普鲁士蓝染色实验代测

普鲁士蓝染色实验代测

普鲁士蓝染色简介：

在酸性条件下，切片内的高铁盐与亚铁作用生成亚铁氰化铁（普鲁士蓝反应）。

铁反应是用来鉴别组织或细胞内出现的黄棕色色素是属于哪一种色素，入黑色素、脂褐素、甲醛色素还是含铁血黄素。

染色步骤（仅供参考）：

1、石蜡切片脱蜡至水；

2、蒸馏水洗两次；

3、取等量2%亚铁氢化钾和2%盐酸混合，染色30~45min；

4、蒸馏水洗，0.1%核固红复染3min（染液用一段时间后调整为5min）；

5、无水乙醇脱水（两缸各5分钟）；

6、正丁醇30s；

7、二甲苯透明（两缸各5min）， 中性树胶封片（封片过程中保证组织上的二甲苯不能干，否则在高倍显微镜下观察易出现小水珠结晶）。

染色结果：

含铁血黄素呈蓝色，胞核呈红色。

注意事项：

1、组织应采用缓冲中性甲醛液固定，若用一般的甲醛液，则应作短时间固定后即包埋切片，经甲醛液固定的组织反应不良。

2、盐酸以分析纯较好，因粗制盐酸内含有较多的铁，可导致假阳性。

3、在操作过程中容器要干净，避免使用铁制工具（可用不绣钢制工具）。

4、铁反应前的各步骤以蒸馏水冲洗，以防自来水内的铁离子与组织内的钙盐结合产生假阳性反应。

5、制作对照片时，取另一张相同连续切片脱蜡至水，置入5%的草酸中作用2~6小时，即可将含铁血黄素溶去，再染普鲁士蓝，铁反应阴性。

普鲁士蓝染色实验代测