microRNA PCR实验代测

microRNA PCR实验代测

microRNA PCR简介

microRNA ( miRNA )是一种机体内源性表达的单链小分子 RNA ,位于基因组非编码区,本身不具有开放阅读框( open reading frame , ORF ),具有高度保守性,时序性和组织特异性。miRNA广 泛存在于各种真核细胞中,不编码任何蛋白质,长度仅为20～24nt.成熟的miRNA 5端有一个磷酸基团,3端为羟基,由具有发夹状结构的约70 ～ 90nt的单链RNA前体经过Dicer酶加工后形成。成熟的miRNA形成RNA诱导的基因沉默复合体( RNA-induced silencing complex , RISC )作用于靶点mRNA ,通过对mRNA剪切或抑制其翻译过程而调控基因的表达。目前人们还不明确miRNA及其靶mRNA之间的作用机制。

microRNA PC实验说明：

1、大部分基因特征前缀为：MIR；

2、需要确认基因是3p还是5p；

实验室操作注意事项：

1.实验时根据试验的情况和性质进行必要的防护。根据试验可能发生的危险事故佩戴必要的防护工具，例如穿好试验服，戴橡胶手套，防护面具，防毒面具等。实验前，要注意清理试验场周围的安全隐患。检查试验装置、药品和相关物品是否有不符合要求的情况等。

2.遵循化学药品的性质和化学反应的规律，不盲目蛮干和主观臆测化学反应的过程。应根据化学反应的性质和过程选择匹配的反应装置，不可图省事省去必要的安全措施。

3.经常估计到实验的危险性

实验事故虽不可预测，但其危险性的大小是可以估计到的。即使对不大了解的实验，也必须推测其危险程度而制订相应的预防措施。象下面这类实验，必须十分注意。

①不了解的反应及操作;

②存在多种危险性的实验(如发生火灾、毒气等);

③在严酷的反应条件(如高温、高压等)下进行的实验。

4.充分作好发生事故时的预防措施并加以检查。

平时注意熟悉需要关闭的主要龙头、电气开关，灭火器的位置及操作方法，避免发生事故时才四处寻找应急的物品。

5.实验的后处理。实验的后处理工作，亦属实验过程的组成部份。特别不可忽略回收溶剂和废液、废弃物等的处理。

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