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心钠素(ANP)放免实验代测

心钠素(ANP)放免实验代测
原理(Principles) 本药盒采用竞争性放射免疫分析方法。125I-ANF 标记物和血样品(或标准品)中的 ANF 与抗体竞争性结合,加入分离剂,使复合物部分与游离抗原部分分离,弃上清,测沉淀物 的放射性计数。放射强度与抗原浓度成反比。

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心钠素(ANP)放免实验代测

原理(Principles) 本药盒采用竞争性放射免疫分析方法。125I-ANF 标记物和血样品(或标准品)中的 ANF 与抗体竞争性结合,加入分离剂,使复合物部分与游离抗原部分分离,弃上清,测沉淀物 的放射性计数。放射强度与抗原浓度成反比。

用途(Intended Use) 心钠素是心房产生和分泌的一种激素,具有很强的利钠、利尿、舒张血管和降低血压 的作用。本药盒采用平衡法,免疫沉淀剂分离法,测定人血浆中 ANF 的含量,用于人心血 管疾病的诊断及治疗监测。

血浆及组织处理 1) 血浆样品:采静脉血 2 mL(空腹),置含有抗凝剂 30 μL 的试管中,立即混匀抗凝, 及时离心取出血浆,分装–20℃保存备用。 2) 组织样品:尽快取出动物脏器(心房、心室或其它组织)吸去血(或用生理盐水洗 并吹干),称重,及时放入 5 至 10 倍组织体积的冷 1N HAC,沸水浴中 10 分钟,取出 上清液,分装–20℃保存备用。测定时可根据组织中 ANF 含量作 1:10 – 1:1000 倍稀释。

正常参考值(Normal Serum values) 各实验室应根据本实验室条件及接触人群的不同,建立自己的正常值范围。 下列数据仅供参考:0.379 ± 0.0766 ng/mL

数据处理(Calculation) 取三级半对数坐标纸,以 B/B0(%)为纵坐标,标准品浓度的对数为横坐标,绘制标准曲 线;样品以 B/B0(%)从标准曲线上查得相应的剂量,再乘以稀释倍数,则为血浆或组织中 ANF 实际含量。也可用 Logit-log 作图或回归计算。

标准曲线: B (cpm) NSB (cpm) B (cpm) NSB (cpm) B/B % 0 0 管 试剂 标准 试剂   - 样品: B (cpm) NSB (cpm) B (cpm) NSB (cpm) B/B % 0 0 管  试剂  样品 - 样品

注意事项(Attention) 1) ANF 是极易失活的多肽,在体液中的生理半衰期只有 2.5 分钟,所组成的药盒也相应 “娇气"。标准品极易吸附管壁,加入温育液,待溶解后上下轻轻翻动,然后置 4℃冰 箱 30 分钟后,再混匀后立即分装加盖或塑料袋包装后存放于–20℃,临用时取出。 2) 血浆或组织样品一定要立即处理,及时分装–20℃存放。溶血者不能使用,否则结果偏 高。 3) 标记物若要分批使用,溶解后分成几份–20℃存放,用前取出,每份一次用完。 4) 加入分离剂后及时离心,暂不离心时可放 4℃(1 小时内离心均可以),但不宜在室温 放置。 5) 分析管离心后弃上清所用的吸头要,否则可能污染 ANF 分析管造成数据异常。

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