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外泌体提取

服务介绍:
外泌体(exosome):是细胞主动向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡样小体,该囊泡可携带多种蛋白质、mRNA、miRNA等,参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。根据外泌体的大小和密度,用不同的离心速度,达到分离出外泌体的超速(差速)离心法,是学术上用的比较多且较认可的外泌体的提取方法,被认为是外泌体提取的黄金方法。

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  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2024-12-02
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详细介绍

服务介绍:

外泌体(exosome):是细胞主动向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡样小体,该囊泡可携带多种蛋白质、mRNA、miRNA等,参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。根据外泌体的大小和密度,用不同的离心速度,达到分离出外泌体的超速(差速)离心法,是学术上用的比较多且较认可的外泌体的提取方法,被认为是外泌体提取的黄金方法。

囊泡

大小(nm)

密度(g/mL)

来源

标记

外泌体

40-200

1.13-1.18

内体(endosomes)

tetraspanins, Alix, TSG101,CD4,CD9

微泡

200-2000

1.16-1.19

质膜(plasma membrane )

integrins, selectins, CD40

凋亡小体

500-2000

1.16-1.28

质膜,内质网(plasma membrane, endoplasmic reticulum)

phosphatidylserine, genomic DNA

Ref: Huilin Shao et al,New Technologies for Analysis of Extracellular Vesicles,Chem.Rev. 2018,118:1917-1950

外泌体应用领域:

外泌体参与不同细胞间的物质传输和信号传递;

外泌体具备一些免疫调节功能(由于有大量免疫相关分子:抗原传递分子、热休克蛋白等);

外泌体参与细胞废物的排泄和处理;

不同来源的外泌体有其特异性,存在着不一样的功能;

外泌体已广泛的被用在医学临床疾病的诊断以及相关预防研究上;

外泌体可能被当做一种药物的载体等

名称

规格

外泌体提取

 

  实验流程:

低速离心去除碎片-过滤-高速离心-超速离心-蛋白浓度检测

注:外泌体 提取后,可另收费进行电镜负染和WB检测(tsg101,cd9,cd63三选二) 

送样运输要求:

细胞上清样本:一个样本提供70ml的培养上清(细胞在含常规FBS培养基中培养一定时间,待细胞融合度约为60% - 70%时,移去原有含FBS的培养基,换成新鲜的含无外泌体血清的培养基,继续培养3天左右,细胞融合度达到80%-95%左右时,收取细胞上清),干冰运输到实验室。

血清样本:血液经普通采-血管采集后室温静置30min,3000g离心15min,收集上层血清,5ml,-80℃纯干冰运输。

 

 



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