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小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒

小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒

简要描述:

上海信帆生物科技有限公司供应的小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒,本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中谷丙转氨酶(ALT)含量。

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小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒
使用说明书   

小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒

本试剂盒仅供研究使用。

使用目的  :
本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中谷丙转氨酶(ALT)含量。
小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠谷丙转氨酶(ALT)水平。用纯化的小鼠谷
丙转氨酶(ALT)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入谷丙转氨
酶(ALT),再与HRP 标记的谷丙转氨酶(ALT)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,
经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下
转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的谷丙转氨酶(ALT)呈正相关。用酶标仪在 450nm
波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠谷丙转氨酶(ALT)浓度。  
试剂盒组成 1  30 倍浓缩洗涤液  20ml×1 瓶  7  终止液  6ml×1 瓶
2  酶标试剂  6ml×1 瓶  8  标准品(40U/L)  0.5ml×1 瓶
3  酶标包被板  12 孔×8 条  9  标准品稀释液  1.5ml×1 瓶
4  样品稀释液  6ml×1 瓶  10  说明书  1 份
5  显色剂A 液  6ml×1 瓶  11  封板膜  2 张    
6  显色剂 B液  6ml×1/瓶  12  密封袋  1 个
标本要求 
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤 操作步骤 操作步骤 操作步骤
1.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
20U/L  5 号标准品  150µl的原倍标准品加入 150µl标准品稀释液
10U/L  4 号标准品  150µl的5 号标准品加入 150µl标准品稀释液
5U/L  3 号标准品  150µl的4 号标准品加入 150µl标准品稀释液
2.5U/L  2 号标准品  150µl的3 号标准品加入 150µl标准品稀释液
1.25U/L  1 号标准品  150µl的2 号标准品加入 150µl标准品稀释液
 
 
2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,
 
然后再加待测样品 10µl(样品zui终稀释度为 5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.  温育:用封板膜封板后置37℃温育 30 分钟。      
4.  配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5次,拍干。
6.  加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。  
7.  温育:操作同 3。
8.  洗涤:操作同 5。
9.  显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
10 分钟.
10.  终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.  测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
操作程序总结: 
小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒 
 
计算
    以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的
OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
 
即为样品的实际浓度。   

 
  
 小鼠谷丙转氨酶(ALT)酶联免疫分析试剂盒
  
 
          

 
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